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遠慕生物詳述:酶聯(lián)免疫試劑盒操作問題!
閱讀次數(shù):738 發(fā)布時間:2016/11/28 16:55:46
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    酶聯(lián)免疫
(ELISA)試劑盒操作注意問題:

    酶聯(lián)免疫(ELISA)試劑盒是比較快捷方便的藥物殘留檢測方法,但對實驗操作條件的要求比較嚴格,實驗條件主要有兩方面組成:

    1、實驗室的操作環(huán)境(但而elisa試劑盒對實驗室操作環(huán)境的要求是幾種藥物殘留檢測方法中相結(jié)較低的)

    2、操作人員的操作熟練程度:由于大部分的試驗操作步驟都是由實驗人員來完成的,人為的誤差相對嚴重一些。

    下面所介紹的內(nèi)容是進行Elisa操作時應該注意的問題,僅供參考,詳情來電咨詢!

    酶聯(lián)免疫試劑盒操作的通用規(guī)則:

    1、要確保微量加樣器的準確性,可以使用蒸餾水和電子天平進行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20℃左右時,1ml的水可以看作是1g,200ul的水可以看作是0.2g),每一把微量加樣器都應該將其量程和量程進行確定。

    2、在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液

    3、吸取液體時速度不且太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準確。

    4、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭的液體和孔壁接觸,液體會自然流下去。吸入液體時的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細作使得部分液體不能流出而造成誤差。

    5、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。

    6、液體全部加入酶標孔后,將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應。

    7、孵育時要使蓋板膜封好酶標板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線形。

    8、實驗前半個小時將試劑從冰箱中取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同。(酶標板只要取出需要量)

    9、由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。

    10、手工洗板時每次加入洗滌液后,應靜置15-30s,不要將一個酶標孔中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

    11、檢測吸光值前應將酶標儀打開,將其預熱30min以上。

    12、底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2mol的濃硫酸,具有腐蝕性,應盡量避免接觸皮膚。

    13、孵育時間應嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。

    14、要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

    15、沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。

    16、不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,所以務必按照所用試劑盒嚴格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性。且同一廠家不同批次的產(chǎn)品也不能交叉使用。

原創(chuàng)作者:上海遠慕生物科技有限公司

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